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          黃曲霉毒素檢測免疫學法

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          黃曲霉毒素檢測免疫學法

          發布日期:2019-02-28 作者:青島貞正分析儀器有限公司 點擊:

               黃曲霉毒素的免疫學檢測方法是將生物大分子的免疫學特性與化學特性結合起來的檢測方法。該方法具有快速、靈敏、對樣品純度要求不高的特點,特別適合于大批量樣本的檢測。用于黃曲霉毒素檢測的免疫學方法有酶聯免疫吸附測定法、放射免疫測定法、親和層析法、熒光偏振免疫測定法及免疫層析法。


             1.酶聯免疫吸附測定(ELISA)法

             ELISA法是在免疫學和細胞工程學基礎上發展出來的- -種微量檢測技術,分為直接法、間接法、雙抗體夾心法和競爭法,其優點是對黃曲霉毒素B1的檢測定性定量準確而且檢測速度快(比薄層法提高了近200倍),特異性強,熒光物質、色素、結構類似物對結果無干擾,回收率高,提取方法簡單,成本較低,特別適合于對黃曲霉毒素8i污染監測控制中大量樣品的篩查。缺點是ELISA法中酶的活性易受反應條件影響,測定結果重復性較差,測定結果易出現假陽性問題;此外EUSA試劑壽命短,需要低溫保存,葡萄酒類、含鹽量高的醬油、含脂量高的花生油在提取時要進行調節pH值、脫鹽、脫脂等特殊處理。

          重慶黃曲霉毒素檢測

              2.親和層析法

              親和層析法利用免疫化學反應原理,采用大劑量的單克隆抗體,選擇性吸附提取液中的抗原物質黃曲霉毒素。由于抗原抗體反應具有高靈敏、高選擇、高特異性等特點,從而大大提高了試樣的凈化效果及檢測靈敏度,同時可顯著減少有毒有害試劑的使用,有利于操作人員的身體健康和環境保護。


              3.放射免疫(RIA)法

              RIA法與EISA法基本相似,不同的是它們所吏用的標記物不同,ELISA法的標記物為酶, RIA法所用的標記物-般為放射性元素氚(3H)。該方法是將毒素-3H標記物與樣品加抗體進行競爭性結合,除去未結合的部分,測定其放射性,放射性強則說明樣品中毒素含量低,反之毒素含量高。實驗證明ELISA比RIA靈敏度更高且更簡便,并且RIA需要特殊設備,有放射性元素污染問題,人員需要安全防護,現在已經很少使用。


              4.熒光偏振免疫測定法

              熒光偏振免疫測定法的主要原理是熒光標記的毒素在樣品緩沖液中與未熒光標記的毒素對特異性抗體的競爭性結合。分子質量越大,分子旋轉速度越慢,熒光偏振值越大。Nasi等報道 了用基于熒光偏振的裝置檢測不同谷物中的黃曲霉毒素。


              5.免疫層析(IC) 法

              IC法是20世紀80年代初發展起來的- -種快速免疫分析技術,其操作簡單,快速,人員不用培訓,且不需特殊的儀器設備,非常適用于現場測試和進行大量樣品的初篩。免疫學與儀器結合方法


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